Résumé: Le centre peptidyl-tranférase (PTC) situé dans la grande sous-unité ribosomale catalyse la formation de la liaison peptidique pendant la biosynthése des protéines. Les structures cristallographiques ont montré que les ribosomes procaryotes sont des ribozymes puisque leur PTC est dépourvu de protéines. Cependant, les cristaux des ribosome humain, nous avons réalisé des expériences de pontage chimique en utilisant un dérivé de l'ARNt rendu chimiquement réactif par l'oxydation au périodate de sodium de la fonction 2', 3' cis-diol du ribose de l'adénosine 3'-terminale (ARNt ASP ox). La fonction dialdéhyde ainsi crée est susceptible de réagir avec les groupements NH2 des résidus lysines (ou arginines) des protéines ribosomales pour former une base de Schiff. La reconstitution in vitro d'un systéme comprenant l'ARNm et les ribosomes nous a permis d'explorer le PTC. L'analyse des complexes ribosomes/ARNm/ARNtASPox, a révélé la présence d'un complexe covalent entre une proteine ribosomale (rP) et l'ARNtox. Sachant que le bras CCA de l'ARNt positionné au site P, de même que la chaînepeptidique estérifiée à son extrémité 3'-OH représentent des substrats qui se lient au PTC, le site catalytique du ribosome, l'extrémité 3'-dialdéhyde de l'ARNtox peut être considérée comme un outil puissant pour rechercher les résidus d'acides aminés basiques du ribosome qui sont en contact ou à proximité de l'extrémité 3'-OH de l'ARNt. Nous proposons donc que la protéine ribosomale crosslinkée a l'ARNtox est située à proximité ou à l'intérieur du centre Peptidyl Transférase (PTC) du ribosome humain. C'est la premiére fois que des travaux biochimiques utilisant un réactif à distance zéro dérivé de l'ARNt mettent en évidence la présence d'une protéine au PTC.

Edition: Paris: Université Pierre et Marie Curie
Langue: Français
Collation: 23 p. ill. ;30 cm
Diplôme: Master2
Etablissement de soutenance: Université Pierre et Marie Curie

Note: Bibliogr. pp.22-23